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色譜回收

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色譜回收是目前應用廣泛的分離、分析、純化有機化合物(包括能通過化學反應轉變為有機化合物的無機物)的有效方法之一。 在已知的有機化合物中,約有80%能用高效液相色譜法分離、分析,而且由于此法條件溫和,不破壞樣品,因此特別適合高沸點、難氣化揮發、熱穩定性差的有機化合物和生命物質。

色譜回收 詳細信息

     色譜回收是目前應用廣泛的分離、分析、純化有機化合物(包括能通過化學反應轉變為有機化合物的無機物)的有效方法之一。 在已知的有機化合物中,約有80%能用高效液相色譜法分離、分析,而且由于此法條件溫和,不破壞樣品,因此特別適合高沸點、難氣化揮發、熱穩定性差的有機化合物和生命物質。

      HPLC系統一般由輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部位。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、與柱或保護住、柱溫控制器等,現代HPLC儀還有微機控制系統,進行自動化儀器控制和數據處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置。

 

一、輸液泵

1.泵的構造和性能

輸液泵是HPLC系統中重要的部件之一。泵的性能好壞直接影響到整個質量和分析結果的可靠性。輸液泵應具備如下性能:流量穩定,其RSD應小于0.5%,這關系到定性定量的準確性;流量范圍寬,分析型應在0.1~10mlmin范圍內連續調,制備型應能達到100mlmin;輸出壓力高,一般應能達到150~300KGCM2:液缸容積小;密封性能好,耐腐蝕。

泵的種類很多,按輸液性質可分為恒壓泵和恒流泵。恒流泵按結構又可分為螺旋注射泵、柱塞往復泵和隔往復泵。恒壓泵受柱陰影響,流量不穩定;螺旋泵缸體太大,這兩種泵己被淘汰目前應用多的是柱塞往復泵。

柱塞往復泵的液缸容積小,可至0.1ml,因此易于清洗和更換流動相,特別適合于再循環和梯度洗脫;改變電機轉速能方便地調節流量,流量不受柱壓影響;泵壓可達400KGCM2。ADW主要缺點是輸出的脈沖性較大,現多彩采用雙泵系統來克服。雙泵按連接方式可分為并聯式和串聯式,一般說來并聯泵的流量重現性較好(RSD為0.1%左右,串聯泵為0.2~0.3%),但出現故障的機會較多(因多了單向閥),價格也較貴。

二、進樣器

一般HPLC分析常用六通進樣閥(以美國RHEODYNE公司的7725和7725I型常見),其關鍵部件由圓形密封墊子(轉子)和固定底座(定子)組成。耐高壓(35~40MPA),進樣量準確,重復性好(0.5%),操作方便。六通閥進樣方式有部分裝液法和完全裝液法兩種。用部分裝液法進樣時,進樣量應不大于定量環體積的50%(多75%),并要求每次進樣體積準確、相同。此法進樣的準確度和重復性決定于注器取樣的熟練程度,而且易產生由進樣引起的峰展寬。用完全裝液法進樣時,進樣量應不小于定量環體積的5~10倍9最少3倍,這樣才能完全置換定量環內和流動相,消除管壁效應,確保進樣的準確度及重復性。

三、色譜柱

色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料好多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,其粒度一般為UM等,柱效理論值可達5~16萬米。對于一般的分析只需5000塔板數的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難的分離物質對則可采用高達2萬的柱子,因此一般10~30CM左右的柱長就能滿足復雜混合物分析的需要。

柱效受柱內外因素影響,為使色譜柱達到佳效率,除柱外死體積要小外,不要有合理的柱結構(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術。即使好的裝填技術,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應。這種管壁區大約是從管壁向內算起30倍料徑的厚度。在一般的液相色譜系統中,柱外效應對柱效的影響遠遠大于管壁效應。

四、檢測器

色譜回收的檢測器分為兩類:通用型檢測器和專用型檢測器。

1.通用型檢測器可連續測量色譜柱的流出物的全部特性變化,通常采用差分測量法,這類檢測器包括示差折光檢測器、介電常數檢測器、電導檢測器等,通用檢測器適用范圍廣,但由于對流動相有響應,因此易受溫度變化、流動相和組分的變化的影響,噪聲和漂移都比較大,靈敏度較低,不能用梯度洗脫。

2.專用型檢測器用以測量被分離樣品組分某種特性的變化。這類檢測器對樣品中組分的某種物理或化學性質敏感,而這一性質是流動相所不具備的,或至少在操作條件下不顯示。這類檢測器包括紫外檢測器、熒光檢測器、放射性檢測器等。二手高效液相色譜儀高價回收 中介茶水豐厚 歡迎參觀指導。


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